Norimos žinios apie mikrobus
Mikroorganizmai – tai gamtoje plačiai paplitusių ir plika akimi nematomų mažyčių organizmų grupė, kurią optinio mikroskopo ar elektroninio mikroskopo pagalba reikia padidinti šimtus, tūkstančius ar net dešimtis tūkstančių kartų. Jie turi mažo dydžio, paprastos struktūros, greito dauginimosi, lengvo keitimo ir stipraus prisitaikymo prie aplinkos privalumus.
Mikroorganizmų klasifikacija:
Yra daug mikroorganizmų rūšių, mažiausiai daugiau nei 100,{1}} rūšių. Pagal jų struktūrą, cheminę sudėtį ir gyvenimo įpročius bei kitus skirtumus galima suskirstyti į tris kategorijas.
Eukariotinės mikrobinės ląstelės branduolys turi didesnį diferenciacijos laipsnį, įskaitant branduolinę membraną, branduolį ir chromosomas; citoplazmoje yra išbaigtų organelių (tokių kaip endoplazminis tinklas, ribosomos ir mitochondrijos ir kt.). Grybai priklauso šiai mikroorganizmų rūšiai.
Prokariotinės mikrobų ląstelės turi mažą branduolio diferenciacijos laipsnį, tik primityvią nukleoplazmą, neturi branduolinės membranos ir branduolio; organelės nėra labai pilnos. Yra daug tokių mikroorganizmų rūšių, įskaitant bakterijas, spirochetas, mikoplazmas, riketsijas, chlamidijas ir aktinomicetus.
Ląsteliniai mikroorganizmai neturi tipiškos ląstelių struktūros ir fermentų sistemos, kuri generuotų energiją, ir gali augti ir daugintis tik gyvose ląstelėse. Virusai priklauso šio tipo mikroorganizmams.
Mikroorganizmų atskyrimas ir valymas
Mikrobų kultūra, kurioje yra daugiau nei viena rūšis, vadinama mišria kultūra. Jei visos kolonijos ląstelės yra kilusios iš vienos tėvų ląstelės, tada kolonija vadinama grynąja kultūra. Nustatant bakterijų rūšis, naudojami mikroorganizmai paprastai turi būti grynos kultūros. Grynosios kultūros gavimo procesas vadinamas atskyrimu ir gryninimu, ir yra daug būdų.
1. Išpilstymo lėkštės metodas
Pirmiausia mikrobų suspensija skiedžiama iš eilės, o tam tikras skiedinio kiekis visiškai sumaišomas su ištirpusia maistine agaro terpe, palaikoma maždaug 40-50 laipsnio, o tada mišinys supilamas į sterilų Petri lėkštelę. Po sukietėjimo plokštelė buvo inkubuojama aukštyn kojomis pastovioje kameroje. Viena ląstelė padauginama, kad susidarytų kolonija, viena kolonija paimama suspensijai ir pirmiau minėti veiksmai kartojami keletą kartų, kad būtų gauta gryna kultūra.
2. Dengimo plokščių plokščių metodas
Pirmiausia mikrobų suspensija tinkamai atskiedžiama, o tam tikras skiedinio kiekis dedamas ant sustingusios sterilios maistinės agaro plokštelės, o po to tirpalas sterilia stikline mentele tolygiai paskirstomas ant terpės paviršiaus. Vieną koloniją galima gauti inkubuojant pastovioje temperatūroje.
3. Plokštelių rašymo metodas
Lengviausias būdas atskirti mikroorganizmus yra dryžiai. Nedidelį kultūros kiekį paskleiskite ant plokštelės, naudodami sterilią kilpą. Yra daug rašymo būdų. Įprasti rašymo metodai, kurie labiau linkę susidaryti kaip viena kolonija, yra pasvirojo brūkšnio metodas, kreivės metodas, kvadratinis metodas, spinduliavimo metodas ir keturių tinklelių metodas. Kai inokuliavimo kilpa juda atgal terpės paviršiumi, bakterinis skystis ant skiepijimo kilpos palaipsniui praskiedžiamas ir galiausiai viena ląstelė išsibarsto ant nubrėžtos linijos. Po kultivavimo kiekviena ląstelė išauga į koloniją.
4. Sodrinimo kultūros metodas
Sodrinimo kultūros metodo metodas ir principas yra labai paprasti. Galime sukurti sąlygas, kurios leistų augti tik norimiems mikrobams, o tokiomis sąlygomis norimi mikrobai gali efektyviai konkuruoti su kitais mikrobais ir savo augimo gebėjimu gerokai pranokti kitus mikrobus. Jei norima išskirti kai kuriuos privalomus parazitus, mėginiai turi būti pasėti į atitinkamas jautrių ląstelių šeimininkų populiacijas, kad augtų daug. Grynas parazitines bakterijas galima gauti pakartotinai sėjant.
5. Anaerobinis metodas
Laboratorijoje, norint atskirti kai kurias anaerobines bakterijas, kaip auginimo indą galima naudoti mėgintuvėlį, kuriame yra pradinė terpė, o mėgintuvėlį keletą minučių pakaitinti verdančio vandens vonelėje, kad būtų pašalintas terpėje ištirpęs deguonis. . Tada jis greitai atšaldomas ir pasėjamas. Po inokuliacijos į terpės paviršių buvo pridėtas sterilus parafinas, kad terpė būtų izoliuota nuo oro. Kitas būdas – po inokuliacijos terpėje esančias dujas pakeisti N2 arba CO2, o mėgintuvėlio angą uždaryti ant liepsnos. Kartais, norint efektyviau atskirti kai kurias anaerobines bakterijas, išskirtą mėginį galima pasėti ant terpės, o tada Petri lėkštelę galima įdėti į visiškai sandarų anaerobinio auginimo įrenginį.
6. Vienos ląstelės (arba vienos sporos) išskyrimo metodas
Norint gauti gryną kultūrą, reikia naudoti mikroseparacijos metodą, kad iš mišrių populiacijų būtų tiesiogiai išskirtos atskiros ląstelės arba atskiri individai. Didesniems mikroorganizmams kapiliaru galima išgauti vieną individą. Mikroorganizmams, kurių individai yra santykinai maži, reikia mikromanipuliatoriaus, kuris po mikroskopu kapiliaru ar mikroadata, kabliuku, kilpele ir pan. paima pavienes mikrobų ląsteles arba sporas, kad būtų gauta grynoji kultūra. Vienos ląstelės atskyrimo metodas turi gana aukštus reikalavimus veikimo technologijai.
Mikrobų kultūra
1. Pagal tai, ar kultivuojant reikia deguonies, jį galima suskirstyti į dvi kategorijas: aerobinę kultūrą ir anaerobinę kultūrą.
Aerobinė kultūra: taip pat žinoma kaip „aerobinė kultūra“. Tai yra, kai šis mikroorganizmas yra kultivuojamas, jam reikia pridėti deguonies, kitaip jis blogai augs. Laboratorijoje įstrižos kultūros gaunamos iš išorės per vatos kamščius gaunant sterilų orą. Didžioji dalis Erlenmejerio kolboje esančios skystos kultūros suplakama kratytuvu, kad į butelį nuolat galėtų patekti išorinis oras.
Anaerobinė kultūra: taip pat žinoma kaip „anaerobinė kultūra“. Tokiems mikroorganizmams auginant nereikia deguonies. Anaerobinių mikroorganizmų auginimo procese svarbiausia yra pašalinti terpėje esantį deguonį.
2. Pagal fizinę terpės būklę ją galima suskirstyti į dvi kategorijas: kietąją kultūrą ir skystąją kultūrą.
Kieta kultūra: tai būdas pasėti štamus į birią ir daug maistinių medžiagų turinčią kietą terpę ir auginti mikroorganizmus tinkamomis sąlygomis.
Skysta kultūra: Eksperimentuose skystoji kultūra gali priversti mikroorganizmus greitai daugintis ir gauti daug kultūrų. Tam tikromis sąlygomis tai taip pat veiksmingas būdas mikroorganizmams atrinkti ir praturtinti bakterijas.
BKMAM biotech teikia atitinkamas laboratorines mikrobų kultūrai skirtas medžiagas:
Vienkartinės plastikinės apvalios/kvadratinės Petri lėkštelės:
lDidelio skaidrumo polistirolo medžiaga (PS);
lPaviršius yra lygus ir plokščias, o mikroskopu stebint ląstelės nėra optinio iškraipymo;
l Krovimo konstrukcija palengvina krovimą ir saugojimą;
l Sterilizavimas etileno oksidu (EO);
l Atsparumas dilimui ir korozijai.
Vienkartinė plastikinė skiepijimo lazdelė/kilpa:
Polistirolo medžiaga (PS);
Apsaugo nuo taršos, endotoksinų, DNazės, Rnazės ir pirogenų;
Nepriklausoma pakuotė buvo sterilizuota;
Puikus apdirbimas ir visos specifikacijos;
Vienkartinis plastikinis ląstelių barstytuvas, bakterijų barstytuvas:
Polistirolo medžiaga (PS);
Apsaugo nuo taršos, endotoksinų, DNazės, Rnazės ir pirogenų;
L formos dizainas, patogus naudoti;
Vienkartinis, lengvas ir patogus.
Nerūdijančio plieno / vienkartinės sterilios specifikacijų plokštės:
Nerūdijančio plieno specifikacijų plokštė pagaminta iš nerūdijančio plieno, o vienkartinė specifikacijų plokštelė pagaminta iš maistinio polipropileno (PP).
Apsaugo nuo taršos, endotoksinų, DNazės, Rnazės ir pirogenų;
Tepimo plotas yra griežtai standartizuotas
Vienoje specifikacijų plokštelės pusėje yra rankena, kurią lengva valdyti
Sterili sandari viena pakuotė, kad būtų išvengta antrinio mėginio užteršimo ir rezultatų klaidų
Vienkartinis naudojimas siekiant išvengti kryžminio užteršimo ir sumažinti darbo krūvį
Sveiki atvykę bendradarbiauti su mumis
Pagarbiai
Michaelas Pengas
michael@bkmbio.com
